Mutacja CALR poprzedzajaca BCR-ABL1 w nietypowym nowotworze mieloproliferacyjnym

Nowotwory mieloproliferacyjne dzieli się na dwa główne typy zależnie od obecności lub nieobecności chromosomu Philadelphia z translokacją t (9; 22) (BCR-ABL1) .1 Mutacje genów sygnałowych uważa się za wzajemnie wykluczające, 2-4 chociaż współistnienie jonowej kinazy 2 (JAK2) V617F i BCR-ABL1 zaobserwowano5. Opublikowaliśmy pacjenta z mutacją zarówno w genie kodującym kalretikulinę (CALR), jak i genu fuzyjnego BCR-ABL1 w tym samym dominującym klonie. Rysunek 1. Ryc. 1. Poziomy BCR-ABL1Transcript iCALRMutation podczas obserwacji pacjenta z nietypowym nowotworem mieloproliferacyjnym. Panel A pokazuje liczbę komórek, zmiany w transkryptach BCR-ABL1 i obciążenie allelem CALR, zgodnie z progresją i leczeniem choroby od 11 lipca 2006 r., Do 26 lutego 2014 r. Poziomy transkryptu BCR-ABL1 (środkowy wykres) są pokazane jako stosunek BCR-ABL1 do ABL1, wyrażony jako procent w skali międzynarodowej, który mieści się w zakresie od 100% do 0,001%, przy n iższych wartościach wskazujących lepszą odpowiedź. Całkowitą odpowiedź molekularną zdefiniowano jako zmniejszenie stosunku transkryptów BCR-ABL1 do transkryptów ABL1 o 0,001 lub mniej (co odpowiada redukcji o 4 log10 jednostek w stosunku do znormalizowanego poziomu podstawowego). Mutację CALR zidentyfikowano za pomocą sekwencjonowania Sangera, a obciążenie allelu zmierzono za pomocą analizy fragmentów DNA. Panel B pokazuje klonalną hierarchię z analizy kolonii hematopoetyczno-progenitorowych podczas ewolucji choroby. CD34 + CD38-CD90 + (frakcja hematopoetycznych komórek macierzystych), CD34 + CD38-CD90- (multipotentna frakcja progenitorowa) i CD34 + CD38 + (frakcja progenitorowa) zostały wyhodowane w indywidualnej studzience, a każdy klon został pobrany i przeanalizowany dla mutacja CALR i transkrypt BCR-ABL1. W 2012 roku podczas terapii dazatynibem nie można było wykryć BCR-ABL1, podczas gdy większość krwiotwórczych komórek progenitorowych miała muta cje CALR, a niektóre miały mutację homozygotyczną (ho). W 2014 roku, po odstawieniu dazatynibu i nawrotu choroby, większość progenitorów miała dodatni wynik del52CALR i BCR-ABL-dodatni. Termin hz oznacza heterozygotyczny. Panel C pokazuje architekturę klonalną. Oryginalny klon był heterozygotyczny dla del52CALR (niebieskie kółka), a następnie nabrał rozgałęzionej struktury: jedna część nabyła homozygotyczną mutację del52CALR (zielone kółko), a druga uzyskała fuzję BCR-ABL1 (pomarańczowe kółka). Szary prostokąt wskazuje subklone dotknięte przez imatinib lub leczenie dazatynibem. 73-letnia kobieta została skierowana do szpitala w czerwcu 2006 roku z powodu 2-letniej historii trombocytozy. Podczas wstępnego badania pacjent miał znaczną splenomegalię kliniczną (rozmiar śledziony, 18 cm długości) z umiarkowaną niedokrwistością (poziom hemoglobiny, 10,9 g na decylitr), erytrocyty łez, liczbę leukocytów 25 000 na milimetr sześcienny z mielo cytozą i trombocytozę (płytka krwi liczyć, 523 000 na milimetr sześcienny). Wysoki poziom transkryptów BCR-ABL1 – (9; 22) (q34; q11) – wykryto przy braku mutacji JAK2 V617F, MPL W515L i MPL W515K. Miała dobrą odpowiedź na imatinib, ze zmniejszeniem liczby leukocytów i wielkości śledziony. Jednak niedokrwistość i trombocytoza pogorszyły się, mimo że poziom transkryptu BCR-ABL1 znacznie się zmniejszył (Figura 1A). Biopsja szpiku kostnego wykazała umiarkowaną mielofibrosę. Pacjent otrzymał kombinację imatynibu i peginterferonu alfa. Z powodu efektów toksycznych interferon zastąpiono kombinacją hydroksymocznika i erytropoetyny. W 2010 r. Poziom transkryptu BCR-ABL1 wzrósł, a imatinib został zastąpiony dazatynibem w dawce 100 mg na dobę. Poziom transkryptu BCR-ABL1 zmniejszył się przez rok, a następnie stopniowo wzrastał, z nawrotem klinicznym w połowie 2013 roku z powodu przerwania leczenia. Pod koniec 2013 roku pacjent został przebadany pod kąte m mutacji CALR, wykryto 3,4 i mutanta del52CALR z wysokim udziałem allelu w granulocytach. Analiza retrospektywna wykazała, że obciążenie del52CALR utrzymywało się na wysokim poziomie od 2006 r. Do 2014 r., Niezależnie od poziomu transkryptu BCR-ABL1 (ryc. 1A). Analiza pojedynczego klonu wykazała, że del52CALR i BCR-ABL1 należą do tego samego klonu, ale del52CALR uzyskano przed BCR-ABL1 (figura 1B). Dzięki temu podejściu możliwe było określenie architektury klonalnej. Część oryginalnego klonu del52CALR uległa progresji do homozygotyczności, podczas gdy druga część uzyskała dodatni wynik BCR-ABL1 (Figura 1C). Żadne inne mutacje kierowcy nie mogły zostać wykryte za pomocą sekwencjonowania całego egzonu. Łącznie wyniki te pokazują, że mutacja CALR była wczesnym wydarzeniem genetycznym, a BCR-ABL1 było wtórnym zdarzeniem prowadzącym do klinicznie nietypowego nowotworu mieloproliferacyjnego u tego pacjenta. Pozytywny względem del52CALR subklon BCR -ABL1 był wrażliwy na imatynib lub dasatynib (Figura 1), ale klon pozytywny względem del52CALR, BCR-ABL1-pozostał oporny. Po tym przypadku zbadaliśmy 11 dodatkowych pr [więcej w: Implanty Stomatologiczne, leczenie endometriozy, ginekolog ]

[podobne: olx myślenice, hashimoto objawy psychiczne, inteligencja niższa niż przeciętna ]